污泥脫水機(jī)速率區(qū)帶離心法
污泥脫水機(jī)離心時先將樣品溶液置于一個由梯度材料形 成的密度梯度液中,離心后被分離組份以區(qū) 帶層分布于梯度液中。
速率區(qū)帶離心法是根據(jù)被分離的粒子在梯度液中沉降速度的不同,離心后分別處于不同的密度梯度層內(nèi)形成幾條分開的樣品區(qū)帶,達(dá)到彼此分離的目的。梯度液在離心過程中以及離心完畢后,污泥脫水機(jī)取樣時起著支持介質(zhì)和穩(wěn)定劑的作用,避免因污泥脫水機(jī)機(jī)械振動而引起已分層的粒子再混合,常用的梯度液有Ficoll, Percoll及蔗糖。此離心法須嚴(yán)格控制離心時間,使得既能使各種粒子在介質(zhì)梯度中形成區(qū)帶,又要把時間控制在任一粒子達(dá)到沉淀前。若離心時間過長,所有的樣品全部都到達(dá)離心管底部;若離心時間不足,則樣品還沒有分離。此法是一種不完全的沉降,沉降受物質(zhì)本身大小的影響較大,因此一般是在物質(zhì)大小相異而密度相同的情況下應(yīng)用。
臨床實驗室常用Percoll作 分離溶液,用于靜脈血中單個 核細(xì)胞的分離。先把梯度液加 入離心管中,溶液的密度從離 心管頂部至底部逐漸增加(正 梯度) 。將所需分離的樣品小 心的加至密度梯度溶液的頂部 ,樣品在梯度溶液表面形成。